Com a expansão da escala de cultivo e o aumento da densidade de cultivo, a doença de Apostichopus japonicus tornou-se cada vez mais significativa, o que trouxe sérios prejuízos para a indústria aquícola. As doenças de Apostichopus japonicus são causadas principalmente por bactérias, vírus e ciliados, entre os quais a síndrome da podridão da pele causada por Vibrio brilhante é a mais grave. Com o agravamento da doença, a parede corporal de Apostichopus japonicus ulcera, formando manchas azuis e brancas, e finalmente se autodissolve até a morte, dissolvendo-se em muco nasal semelhante a um coloide. Na prevenção e tratamento tradicionais de doenças, os antibióticos são amplamente utilizados. Mas o uso a longo prazo de antibióticos não só traz o perigo oculto de resistência bacteriana e resíduos de medicamentos, mas também traz segurança alimentar e poluição ambiental. Portanto, o desenvolvimento de uma preparação não poluente, sem resíduos e segura para reduzir a doença do pepino-do-mar é um dos pontos principais da pesquisa atual.

O diformato de potássio é um pó branco cristalino solto, seco e insípido. É o primeiro aditivo alimentar não antibiótico aprovado pela União Europeia para substituir antibióticos. Pode promover o crescimento de animais cultivados, inibir o crescimento de bactérias nocivas e melhorar o ambiente intestinal. O diformato de potássio pode melhorar significativamente o crescimento e a produtividade de organismos aquáticos.

1 Resultados do teste

1.1 Efeitos do diformato de potássio na dieta sobre o crescimento e a sobrevivência do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

A taxa de crescimento específico de Apostichopus japonicus aumentou significativamente com o aumento do teor de diformato de potássio na dieta. Quando o teor de diformato de potássio na dieta atingiu 0,8%, ou seja, quando o teor de diformato de potássio na dieta foi de 1,0% e 1,2%, a taxa de crescimento específico de Apostichopus japonicus foi significativamente maior do que a dos outros tratamentos, mas não houve diferença significativa (P > 0,05) (Tabela 2-2). A taxa de sobrevivência do pepino-do-mar foi de 100% em todos os grupos.

1.2 Efeitos do diformato de potássio na dieta sobre os índices imunológicos do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Em comparação com o grupo controle, diferentes níveis de dicarboxilato de potássio puderam melhorar a capacidade fagocitária dos celomócitos e a produção de O2 em diferentes graus (Tabela 2-3). Quando o diformato de potássio foi adicionado a 1,0% e 1,2%, a atividade fagocitária dos celomócitos e a produção de espécies reativas de oxigênio O2 em pepinos-do-mar foram significativamente maiores do que no grupo controle, mas não houve diferenças significativas entre os grupos de 1% e 1,2% de diformato de potássio, ou entre outros níveis de diformato de potássio e o grupo controle. Com o aumento do teor de dicarboxilato de potássio na ração, a SOD e a NOS do pepino-do-mar aumentaram.

1.3 Efeito do diformato de potássio na dieta sobre a resistência do pepino-do-mar à infecção por Vibrio brilhante

1,4 dias após o desafio, a mortalidade cumulativa de pepinos-do-mar no grupo controle foi de 46,67%, significativamente maior do que nos grupos com diformato de potássio a 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% e 1,2% (26,67%, 26,67%, 30%, 30% e 23,33%), mas não houve diferença significativa em relação ao grupo de tratamento a 0,2% (38,33%). A mortalidade de pepinos-do-mar nos grupos com diformato de potássio a 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% e 1,2% não apresentou diferença significativa.

2. Discussão

2.1 Efeito do dicarboxilato de potássio no crescimento do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Em animais, o mecanismo de ação do dicarboxilato de potássio é principalmente penetrar no trato gastrointestinal, melhorar o ambiente gastrointestinal, regular o pH e eliminar bactérias nocivas (Ramli e Sunanto, 2005). Além disso, o diformato de potássio também pode promover a absorção de nutrientes na ração e melhorar a digestibilidade e a taxa de utilização de animais cultivados. Na aplicação em animais aquáticos, experimentos demonstraram que o diformato de potássio pode melhorar significativamente o crescimento e a taxa de sobrevivência de camarões (He Suxu, Zhou Zhigang et al., 2006). Neste estudo, o crescimento do pepino-do-mar (Apostichopus japonicus) foi promovido pela adição de dicarboxilato de potássio à ração, o que foi consistente com os resultados da aplicação de dicarboxilato de potássio em leitões e suínos em terminação relatados por Verland. M (2000).

2.2 Efeito do dicarboxilato de potássio na imunidade do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus possui o mesmo mecanismo de defesa de outros equinodermos, que é complementado por uma resposta imune celular e não celular (humoral). É usado principalmente para identificar e eliminar corpos estranhos que entram no corpo do animal, ou transformá-los em substâncias inofensivas, e reparar feridas. A resposta imune celular dos equinodermos é complementada por uma variedade de celomócitos, que formam o sistema de defesa dos equinodermos. As principais funções dessas células incluem fagocitose, reação de citotoxina e produção de substâncias antibacterianas no nível da coagulação (kudriavtsev, 2000). No processo de fagocitose, os celomócitos podem ser induzidos por bactérias ou componentes da parede celular bacteriana a produzir espécies reativas de oxigênio (ERO), incluindo NO, H2O2, OH e O2-. Neste experimento, a adição de 1,0% e 1,2% de dicarboxilato de potássio à dieta aumentou significativamente a atividade fagocitária dos celomócitos e a produção de espécies reativas de oxigênio. No entanto, o mecanismo pelo qual o diformato de potássio aumenta a atividade fagocitária e a produção de O₂ precisa ser mais bem estudado.

2.3 Efeito do dicarboxilato de potássio na flora intestinal do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

O dicarboxilato de potássio pode ser decomposto em ácido fórmico e formato em ambiente alcalino fraco e entrar nas células microbianas através da membrana celular. Ele pode alterar o ambiente de vida de microrganismos nocivos, como Escherichia coli e Salmonella, alterando o valor do pH dentro das células e impedindo sua reprodução, de modo a regular o equilíbrio microecológico intestinal (eidelsburger, 1998). O efeito do dicarboxilato de potássio na microflora intestinal: macroscopicamente, o H + produzido pela decomposição do dicarboxilato de potássio reduz o valor do pH no intestino e inibe o crescimento da microflora intestinal. Microscopicamente, o H + entra nas células bacterianas através da membrana celular, destrói diretamente a atividade de enzimas intracelulares, afeta o metabolismo de proteínas microbianas e ácidos nucleicos e desempenha um papel na esterilização (Roth, 1998). Os resultados mostraram que o diformato de potássio teve pouco efeito sobre o total de bactérias intestinais do pepino-do-mar, mas pode inibir significativamente o número de Vibrio.

2.4 Efeito do dicarboxilato de potássio na resistência a doenças do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Vibrio splendens é a bactéria patogênica da síndrome da podridão da pele do pepino-do-mar, prejudicial à produção e ao cultivo de pepino-do-mar. Este experimento demonstrou que a adição de dicarboxilato de potássio à ração reduziu a mortalidade de pepinos-do-mar infectados com Vibrio brilhante. Isso pode estar relacionado ao efeito inibitório do diformato de potássio sobre o Vibrio.

3 Conclusão

Os resultados mostraram que o diformato de potássio na dieta teve um efeito significativo no crescimento de Apostichopus japonicus, teve um efeito positivo na imunidade inespecífica de Apostichopus japonicus e aumentou a imunidade humoral e celular de Apostichopus japonicus. A adição de dicarboxilato de potássio na dieta reduziu significativamente o número de bactérias nocivas no intestino do pepino-do-mar e aumentou a resistência a doenças do pepino-do-mar infectado com Vibrio brilhante. Em conclusão, o dicarboxilato de potássio pode ser usado como um reforço imunológico na alimentação de pepino-do-mar, e a dosagem apropriada de dicarboxilato de potássio é de 1,0%.