ResumoO experimento foi conduzido para estudar os efeitos da diludina no desempenho de postura e na qualidade dos ovos em galinhas poedeiras, bem como para investigar o mecanismo desses efeitos por meio da determinação de índices nos ovos e parâmetros séricos. Cento e vinte e quatro galinhas poedeiras ROM foram divididas em quatro grupos, cada um com quatro repetições de 64 galinhas. Os grupos de tratamento receberam a mesma dieta basal suplementada com 0, 100, 150 e 200 mg/kg de diludina, respectivamente, durante 80 dias. Os resultados foram os seguintes: a adição de diludina à dieta melhorou o desempenho de postura das galinhas, sendo o tratamento com 150 mg/kg o mais eficaz; a taxa de postura aumentou 11,8% (p < 0,01), enquanto a conversão alimentar diminuiu 10,36% (p < 0,01). O peso dos ovos aumentou com o aumento da dose de diludina adicionada. A diludina diminuiu significativamente a concentração sérica de ácido úrico (p < 0,01) e a concentração sérica de cálcio (Ca).2+e teor de fosfato inorgânico, e aumento da atividade da fosfatase alcalina (ALP) sérica (p < 0,05), tendo, portanto, efeitos significativos na redução da quebra (p < 0,05) e anormalidades (p < 0,05) dos ovos; a diludina aumentou significativamente a altura da clara. O valor de Haugh (p < 0,01), a espessura e o peso da casca (p < 0,05), 150 e 200 mg/kg de diludina também diminuíram o colesterol total na gema do ovo (p < 0,05), mas aumentaram o peso da gema do ovo (p < 0,05). Além disso, a diludina pode aumentar a atividade da lipase (p < 0,01) e diminuir o teor de triglicerídeos (TG3) (p < 0,01) e colesterol (CHL) (p < 0,01) no soro, reduziu a porcentagem de gordura abdominal (p < 0,01) e o teor de gordura hepática (p < 0,01), apresentando capacidade de prevenir a esteatose hepática em galinhas. A diludina aumentou significativamente a atividade da SOD no soro (p < 0,01) quando adicionada à dieta por mais de 30 dias. No entanto, não houve diferença significativa nas atividades da GPT e da GOT no soro entre o grupo controle e o grupo tratado. Infere-se que a diludina pode prevenir a oxidação da membrana celular.
Palavras-chaveDiludina; galinha; SOD; colesterol; triglicerídeo; lipase
O diludine é um novo aditivo vitamínico antioxidante não nutritivo com os seguintes efeitos:[1-3]de restringir a oxidação da membrana biológica e estabilizar o tecido das células biológicas, etc. Na década de 1970, um especialista agrícola da Letônia, na antiga União Soviética, descobriu que a diludina tinha esses efeitos.[4]de promover o crescimento de aves e resistir ao congelamento e ao envelhecimento de algumas plantas. Foi relatado que a diludina não só promove o crescimento animal, como também melhora significativamente o desempenho reprodutivo dos animais, aumentando a taxa de prenhez, a produção de leite, a produção de ovos e a taxa de eclosão das fêmeas.[1, 2, 5-7]O estudo da diludina na China teve início na década de 1980, e a maioria dos estudos sobre a diludina no país se limita, até o momento, aos efeitos do uso, com poucos relatos de ensaios em galinhas poedeiras. Chen Jufang (1993) relatou que a diludina pode melhorar a produção e o peso dos ovos em aves, mas não aprofundou o assunto.[5]o estudo do seu mecanismo de ação. Portanto, implementamos o estudo sistemático do efeito e do mecanismo de ação alimentando galinhas poedeiras com uma dieta enriquecida com diludina, e parte dos resultados é apresentada a seguir:
Tabela 1. Composição e componentes nutricionais da dieta experimental.
%
----------------------------------------------------------------------------------------------
Composição da dieta Componentes nutricionais
----------------------------------------------------------------------------------------------
Milho 62 ME③ 11,97
Polpa de feijão 20 CP 17,8
Farinha de peixe 3 Ca 3,42
Farinha de colza 5 P 0,75
Farinha de ossos 2 M e 0,43
Farinha de pedra 7,5 M e Cys 0,75
Metionina 0,1
Sal 0,3
Multivitaminas① 10
Elementos traço② 0,1
------------------------------------------------------------------------------------------
① Multivitamínico: 11 mg de riboflavina, 26 mg de ácido fólico, 44 mg de orizanina, 66 mg de niacina, 0,22 mg de biotina, 66 mg de vitamina B6, 17,6 µg de vitamina B12, 880 mg de colina, 30 mg de vitamina K, 66 UI de vitamina D.E, 6600 UTI de VDe 20.000 UTI de VA, são adicionados a cada quilograma da dieta; e 10g de multivitamínico são adicionados a cada 50kg da dieta.
② Oligoelementos (mg/kg): 60 mg de Mn, 60 mg de Zn, 80 mg de Fe, 10 mg de Cu, 0,35 mg de I e 0,3 mg de Se são adicionados a cada quilograma da dieta.
③ A unidade de energia metabolizável refere-se a MJ/kg.
1. Materiais e métodos
1.1 Material de teste
A Beijing Sunpu Biochem. & Tech. Co., Ltd. deverá fornecer a diludina; e o animal de teste deverá ser galinha poedeira comercial Roman com 300 dias de idade.
Dieta experimental: a dieta experimental deve ser preparada de acordo com as condições reais de produção, com base no padrão NRC, conforme mostrado na Tabela 1.
1.2 Método de teste
1.2.1 Experimento de alimentação: o experimento de alimentação deve ser implementado na granja da empresa Hongji, na cidade de Jiande. Para isso, 1024 galinhas poedeiras Roman foram selecionadas e divididas aleatoriamente em quatro grupos de 256 aves cada (cada grupo foi testado quatro vezes, e cada galinha, 64 vezes). As galinhas foram alimentadas com quatro dietas contendo diferentes concentrações de diludina, sendo 0, 100, 150 e 200 mg/kg de ração adicionados a cada grupo. O experimento teve início em 10 de abril de 1997, com as galinhas tendo livre acesso à água e ao alimento. Foram registrados o consumo de alimento por cada grupo, a taxa de postura, a produção de ovos, a quantidade de ovos quebrados e o número de ovos anormais. O experimento foi encerrado em 30 de junho de 1997.
1.2.2 Medição da qualidade dos ovos: Vinte ovos devem ser selecionados aleatoriamente durante os 40 dias de teste para medir os indicadores relacionados à qualidade, como índice de formato do ovo, unidade Haugh, peso relativo da casca, espessura da casca, índice da gema, peso relativo da gema, etc. Além disso, o teor de colesterol na gema deve ser medido pelo método COD-PAP na presença do reagente Cicheng, produzido pela Ningbo Cixi Biochemical Test Plant.
1.2.3 Medição dos índices bioquímicos séricos: Dezesseis galinhas de cada grupo devem ser selecionadas a cada 30 dias de teste e ao final do experimento para a preparação do soro, após coleta de sangue da veia da asa. O soro deve ser armazenado em baixa temperatura (-20 °C) para a posterior mensuração dos índices bioquímicos relevantes. A porcentagem de gordura abdominal e o teor de lipídios no fígado devem ser medidos após o abate e a remoção da gordura abdominal e do fígado, após a coleta de sangue.
A superóxido dismutase (SOD) deve ser medida pelo método de saturação, utilizando o kit de reagentes produzido pelo Instituto de Pesquisa Bioquímica e Tecnológica de Beijing Huaqing. O ácido úrico (UN) no soro deve ser medido pelo método Uricase-PAP, utilizando o kit de reagentes Cicheng; os triglicerídeos (TG3) devem ser medidos pelo método GPO-PAP em uma etapa, utilizando o kit de reagentes Cicheng; a lipase deve ser medida por nefelometria, utilizando o kit de reagentes Cicheng; o colesterol total (CHL) sérico deve ser medido pelo método COD-PAP, utilizando o kit de reagentes Cicheng; a transaminase glutâmico-pirúvica (GPT) deve ser medida por colorimetria, utilizando o kit de reagentes Cicheng; a transaminase glutâmico-oxalacética (GOT) deve ser medida por colorimetria, utilizando o kit de reagentes Cicheng. A fosfatase alcalina (ALP) deve ser medida utilizando o método de taxa na presença do kit de reagentes de Cicheng; o íon cálcio (Ca²⁺)2+A concentração de fósforo (P) no soro deve ser medida pelo método do complexo azul de metiltimol, utilizando o kit de reagentes de Cicheng; a concentração de fósforo inorgânico (P) deve ser medida pelo método do azul de molibdato, também utilizando o kit de reagentes de Cicheng.
2 Resultado do teste
2.1 Efeito no desempenho de postura
O desempenho de postura dos diferentes grupos processados com diludina é apresentado na Tabela 2.
Tabela 2. Desempenho de galinhas alimentadas com dieta basal suplementada com quatro níveis de diludina.
| Quantidade de diludina a ser adicionada (mg/kg) | ||||
| 0 | 100 | 150 | 200 | |
| Ingestão de ração (g) | | |||
| Taxa de postura (%) | ||||
| Peso médio do ovo (g) | ||||
| Proporção de matéria-prima para ovo | ||||
| Taxa de ovos quebrados (%) | ||||
| Taxa de ovos anormais (%) | ||||
Conforme a Tabela 2, as taxas de postura de todos os grupos tratados com diludina melhoraram significativamente, sendo o efeito ótimo obtido com a dose de 150 mg/kg (até 83,36%), representando uma melhoria de 11,03% (p<0,01) em comparação com o grupo de referência; portanto, a diludina tem o efeito de melhorar a taxa de postura. Observando o peso médio dos ovos, nota-se um aumento (p>0,05) com o aumento da quantidade de diludina na dieta diária. Em comparação com o grupo de referência, a diferença entre as partes tratadas dos grupos com 200 mg/kg de diludina não foi significativa quando se adicionou uma média de 1,79 g de ração. No entanto, a diferença torna-se gradualmente mais evidente com o aumento da diludina, e a diferença na proporção de matéria orgânica para ovo entre as partes processadas é óbvia (p<0,05), sendo o efeito ótimo obtido com 150 mg/kg de diludina, numa proporção de 1,25:1, o que representa uma redução de 10,36% (p<0,01) em comparação com o grupo de referência. Observando a taxa de ovos quebrados em todas as partes processadas, nota-se que essa taxa (p<0,05) pode ser reduzida com a adição de diludina à dieta diária; e a porcentagem de ovos anormais também diminui (p<0,05) com o aumento da dose de diludina.
2.2 Efeito na qualidade dos ovos
Conforme observado na Tabela 3, o índice de formato do ovo e a densidade específica do ovo não são afetados (p>0,05) quando a diludina é adicionada à dieta diária, e o peso da casca aumenta com o aumento da quantidade de diludina adicionada à dieta diária, com aumentos de 10,58% e 10,85% (p<0,05), respectivamente, em comparação com os grupos de referência quando 150 e 200 mg/kg de diludina são adicionados. A espessura da casca do ovo também aumenta com o aumento da quantidade de diludina na dieta diária, com um aumento de 13,89% (p<0,05) quando 100 mg/kg de diludina são adicionados em comparação com os grupos de referência, e aumentos de 19,44% (p<0,01) e 27,7% (p<0,01), respectivamente, quando 150 e 200 mg/kg são adicionados. A unidade Haugh (p<0,01) apresentou melhora significativa com a adição de diludina, indicando que esta promove a síntese da clara espessa do ovo. A diludina também melhorou o índice da gema, embora a diferença não tenha sido estatisticamente significativa (p<0,05). Os teores de colesterol na gema dos ovos diferiram entre os grupos e foram significativamente reduzidos (p<0,05) após a adição de 150 e 200 mg/kg de diludina. Os pesos relativos da gema variaram de acordo com a quantidade de diludina adicionada, com aumentos de 18,01% e 14,92% (p<0,05) nas doses de 150 mg/kg e 200 mg/kg, respectivamente, em comparação com o grupo de referência. Portanto, a dose adequada de diludina promove a síntese da gema.
Tabela 3. Efeitos da diludina na qualidade dos ovos.
| Quantidade de diludina a ser adicionada (mg/kg) | ||||
| Qualidade dos ovos | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Índice de formato do ovo (%) | | |||
| Densidade específica do ovo (g/cm3) | ||||
| Peso relativo da casca do ovo (%) | ||||
| Espessura da casca do ovo (mm) | ||||
| Unidade Haugh (U) | ||||
| Índice de gema de ovo (%) | ||||
| Colesterol da gema do ovo (%) | ||||
| Peso relativo da gema do ovo (%) | ||||
2.3 Efeitos na percentagem de gordura abdominal e no teor de gordura hepática das galinhas poedeiras
Veja as Figuras 1 e 2 para os efeitos da diludina na porcentagem de gordura abdominal e no teor de gordura hepática das galinhas poedeiras.
Figura 1. Efeito da diludina na porcentagem de gordura abdominal (PAF) de galinhas poedeiras.
| Percentagem de gordura abdominal | |
| Quantidade de diludina a ser adicionada |
Figura 2. Efeito da diludina no teor de gordura hepática (GH) de galinhas poedeiras.
| Teor de gordura no fígado | |
| Quantidade de diludina a ser adicionada |
Conforme mostrado na Figura 1, as porcentagens de gordura abdominal do grupo de teste foram reduzidas em 8,3% e 12,11% (p<0,05), respectivamente, quando 100 e 150 mg/kg de diludina foram adicionados em comparação com o grupo de referência, e a porcentagem de gordura abdominal foi reduzida em 33,49% (p<0,01) quando 200 mg/kg de diludina foram adicionados. Conforme mostrado na Figura 2, o teor de gordura hepática (absolutamente seca) processado por 100, 150 e 200 mg/kg de diludina foi reduzido em 15,00% (p<0,05), 15,62% (p<0,05) e 27,7% (p<0,01), respectivamente, em comparação com o grupo de referência; Portanto, a diludina tem o efeito de reduzir a porcentagem de gordura abdominal e o teor de gordura hepática das porcas, sendo o efeito ótimo obtido com a adição de 200 mg/kg de diludina.
2.4 Efeito sobre o índice bioquímico sérico
Conforme observado na Tabela 4, a diferença entre as partes processadas durante a Fase I (30 dias) do teste de SOD não é evidente, e os índices bioquímicos séricos de todos os grupos aos quais a diludina foi adicionada na Fase II (80 dias) do teste foram superiores aos do grupo de referência (p<0,05). O ácido úrico (p<0,05) no soro pode ser reduzido com a adição de 150 mg/kg e 200 mg/kg de diludina; enquanto o efeito (p<0,05) é mais pronunciado com a adição de 100 mg/kg de diludina na Fase I. A diludina também pode reduzir os triglicerídeos no soro, sendo o efeito ótimo (p<0,01) no grupo que recebeu 150 mg/kg de diludina na Fase I e no grupo que recebeu 200 mg/kg de diludina na Fase II. O colesterol total no soro é reduzido com o aumento da diludina adicionada à dieta diária, mais especificamente, os níveis de colesterol total no soro são reduzidos em 36,36% (p<0,01) e 40,74% (p<0,01), respectivamente, quando 150 mg/kg e 200 mg/kg de diludina são adicionados na Fase I em comparação com o grupo de referência, e reduzidos em 26,60% (p<0,01), 37,40% (p<0,01) e 46,66% (p<0,01), respectivamente, quando 100 mg/kg, 150 mg/kg e 200 mg/kg de diludina são adicionados na Fase II em comparação com o grupo de referência. Além disso, a ALP aumenta com o aumento da diludina adicionada à dieta diária, sendo que os valores de ALP no grupo ao qual foram adicionados 150 mg/kg e 200 mg/kg de diludina foram significativamente maiores do que no grupo de referência (p<0,05).
Tabela 4. Efeitos da diludina nos parâmetros séricos.
| Quantidade de diludina a ser adicionada (mg/kg) na Fase I (30 dias) do teste. | ||||
| Item | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superóxido dismutase (mg/mL) | | |||
| Ácido úrico | ||||
| Triglicerídeos (mmol/L) | ||||
| Lipase (U/L) | ||||
| Colesterol (mg/dL) | ||||
| Transaminase glutâmico-pirúvica (U/L) | ||||
| Transaminase glutâmico-oxalacética (U/L) | ||||
| Fosfatase alcalina (mmol/L) | ||||
| Íon cálcio (mmol/L) | ||||
| Fósforo inorgânico (mg/dL) | ||||
| Quantidade de diludina a ser adicionada (mg/kg) na Fase II (80 dias) do teste. | ||||
| Item | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superóxido dismutase (mg/mL) | | |||
| Ácido úrico | ||||
| Triglicerídeos (mmol/L) | ||||
| Lipase (U/L) | ||||
| Colesterol (mg/dL) | ||||
| Transaminase glutâmico-pirúvica (U/L) | ||||
| Transaminase glutâmico-oxalacética (U/L) | ||||
| Fosfatase alcalina (mmol/L) | ||||
| Íon cálcio (mmol/L) | ||||
| Fósforo inorgânico (mg/dL) | ||||
3. Análise e discussão
3.1 O teste com diludina melhorou a taxa de postura, o peso do ovo, a unidade Haugh e o peso relativo da gema, indicando que a diludina teve efeitos na promoção da assimilação de proteínas e no aumento da síntese da clara espessa e da proteína da gema. Além disso, o teor de ácido úrico no soro foi reduzido significativamente; e é geralmente reconhecido que a redução do teor de nitrogênio não proteico no soro significa que a velocidade de catabolismo da proteína foi reduzida e o tempo de retenção de nitrogênio foi prolongado. Esse resultado forneceu a base para o aumento da retenção de proteínas, promovendo a postura de ovos e melhorando o peso dos ovos em galinhas poedeiras. O resultado do teste apontou que o efeito de postura é ótimo quando 150 mg/kg de diludina são adicionados, o que está essencialmente de acordo com o resultado.[6,7]de Bao Erqing e Qin Shangzhi e adquirido pela adição de diludina no período final de postura de galinhas poedeiras. O efeito foi reduzido quando a quantidade de diludina excedeu 150 mg/kg, o que pode ser devido à transformação de proteínas.[8]foi afetado devido à dosagem excessiva e à sobrecarga metabólica do órgão em relação à diludina.
3.2 A concentração de Ca2+A concentração de fósforo (P) no soro do ovo em postura foi reduzida, inicialmente, e a atividade da fosfatase alcalina (ALP) aumentou significativamente na presença de diludina, o que indica que a diludina afetou o metabolismo de cálcio (Ca) e fósforo (P) de forma evidente. Yue Wenbin relatou que a diludina pode promover a absorção.[9] dos elementos minerais Fe e Zn; a ALP estava presente principalmente em tecidos como fígado, ossos, trato intestinal, rins, etc.; a ALP no soro era proveniente principalmente do fígado e dos ossos; a ALP nos ossos estava presente principalmente nos osteoblastos e podia combinar o íon fosfato com o Ca2+ do soro após transformação, promovendo a decomposição do fosfato e aumentando a concentração do íon fosfato, sendo depositada no osso na forma de hidroxiapatita, etc., levando à redução de Ca e P no soro, o que está de acordo com o aumento da espessura da casca do ovo e do peso relativo da casca nos indicadores de qualidade do ovo. Além disso, a taxa de ovos quebrados e a porcentagem de ovos anormais foram reduzidas significativamente em termos de desempenho de postura, o que também explica esse ponto.
3.3 A deposição de gordura abdominal e o teor de gordura hepática das galinhas poedeiras foram reduzidos significativamente com a adição de diludina à dieta, o que indica que a diludina teve o efeito de inibir a síntese de gordura no organismo. Além disso, a diludina pôde melhorar a atividade da lipase sérica no estágio inicial; a atividade da lipase aumentou significativamente no grupo que recebeu 100 mg/kg de diludina, e os níveis de triglicerídeos e colesterol no soro foram reduzidos (p<0,01), o que indica que a diludina pode promover a decomposição de triglicerídeos e inibir a síntese de colesterol. A deposição de gordura pode ser inibida devido à ação da enzima do metabolismo lipídico no fígado.[10,11]e a redução do colesterol na gema do ovo também explicou esse ponto [13]. Chen Jufang relatou que a diludina poderia inibir a formação de gordura no animal e melhorar a porcentagem de carne magra em frangos de corte e suínos, além de ter efeito no tratamento da esteatose hepática. O resultado do teste esclareceu esse mecanismo de ação, e os resultados da dissecção e observação das galinhas do teste também comprovaram que a diludina poderia reduzir significativamente a incidência de esteatose hepática em galinhas poedeiras.
3.4 GPT e GOT são dois indicadores importantes que refletem as funções do fígado e do coração, e o fígado e o coração podem ser danificados se suas atividades forem muito altas. As atividades de GPT e GOT no soro não foram alteradas de forma significativa quando a diludina foi adicionada ao teste, o que indicou que o fígado e o coração não foram danificados; além disso, o resultado da medição de SOD mostrou que a atividade da SOD no soro pôde ser melhorada de forma significativa quando a diludina foi usada por um certo período de tempo. A SOD refere-se ao principal eliminador do radical livre superóxido no corpo; é importante para manter a integridade da membrana biológica, melhorar a capacidade imunológica do organismo e manter a saúde do animal quando o teor de SOD no corpo está aumentado. Quh Hai, et al. relataram que a diludina pode melhorar a atividade da 6-glicose fosfato desidrogenase na membrana biológica e estabilizar os tecidos [2] da célula biológica. Sniedze destacou que a diludina inibiu a atividade [4] da NADPH citocromo C redutase, após estudar a relação entre a diludina e a enzima relevante na cadeia de transferência de elétrons específica para NADPH em microssomas de fígado de rato. Odydents também apontou que a diludina estava relacionada [4] ao sistema oxidase composto e à enzima microssomal relacionada ao NADPH; e que o mecanismo de ação da diludina, após entrar no organismo animal, consiste em resistir à oxidação e proteger a membrana biológica [8] interceptando a atividade da enzima de transferência de elétrons NADPH do microssomo e restringindo o processo de peroxidação do composto lipídico. O resultado do teste comprovou a função protetora da diludina na membrana biológica, desde as alterações na atividade da SOD até as alterações nas atividades da GPT e da GOT, e confirmou os resultados dos estudos de Sniedze e Odydents.
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Data da publicação: 07/06/2021

